為保證測試結果的準確可靠，新制造、使用中和修理后的分光光度計都應該定期進行檢定。國家技術監(jiān)督局批準頒布了各類紫外、可見及近紅外分光光度計的堅定規(guī)程。我們在驗收儀器時應按照儀器說明書及檢驗合同進行驗收。檢定規(guī)程規(guī)定，檢定周期為半年，兩次檢定合格的儀器檢定周期可延長至一年。下面簡單介紹分光光度計的檢驗方法。

1．波長的準確度

波長準確度是指單色光zui大強度的波長值與波長指示值之差。可以用汞燈較強光譜線253.65、296.73、313.16、365.02、404.66、435.83、546.07nm或氫燈（486.13）、氘燈486.00nm的譜線來檢驗。

稀土玻璃如鐠釹玻璃、鈥玻璃在相當寬的波長范圍內有特征吸收峰。由儀器生產廠作為附件提供。鐠釹濾光片的吸收峰為528.7nm和807.7 nm。

如果經檢驗儀器的波長準確度不合格，應按照儀器說明書進行調整。

2．穩(wěn)定度

在光電管不受光的條件下，用零點調節(jié)器將儀器調至零點，觀察3min，讀取透射比（透過率）的變化，即為零點穩(wěn)定度。

在光譜范圍兩端向中間靠10nm處，例如721型儀器的370nm和790nm處，調整零點后，打開光門，使光電管受光，調節(jié)透過率為95％（數顯儀器調至100％）處，觀察3min讀取透過率的變化，即為光電流穩(wěn)定度。

3.投射比正確度

投射比的校正的方法中有中性玻璃濾光片法（可見光區(qū)）和標準溶液法。

經常使用的使標準溶液法，具體操作為：配置質量分數0.06000/1000（即1000g溶液中含K2Cr2O70.06000g）的K2Cr2O7的0.001mol/LHClO4的標準溶液。以0.001mol/LHClO4為參比，以1cm的石英吸收池分別在235、257、313、350nm波長處測定透射比，與表13——4所列標準溶液的標準值比較，根據儀器級別其差值應在0.8％——2.5％之內。

表13——4質量分數0.06000/1000 K2Cr2O7溶液的透射比

4.雜散光

不屬于單色器給定波長，由于反射或散射等射到檢測器的光稱為雜散光。雜散光的檢驗是在較短波長下，測定某透過溶液的投射比。根據美國哈希分光光度計的級別不同，有的T>0.001%，有的到T<0.6%。

光柵式儀器用1cm配套合格的吸收池，在380nm處，以蒸餾水為參比，測定50.0g/L的亞硝酸鈉標準溶液的透射比（透射信號和入射信號之比），即為儀器在相應波長處的雜散光。

5.吸收池的配套性

美國哈希分光光度計在定量工作中，尤其是在紫外光波長測定時，需要對吸收池作校準及配對工作，以消除吸收池的誤差。

配套性檢驗方法是：石英吸收池在220nm處，裝蒸餾水；在350nm處，裝K2Cr2O7的0.001mol/L HClO4溶液。玻璃吸收池在600nm處，裝蒸餾水；在400nm處，裝K2Cr2O7溶液（配法同上）；以一個吸收池為參比，調節(jié)T為100.0％測定其它各池的透射比。透射比之差小于0.5％的池可配對成一套。

在實際工作中，可采用如下校準方法：在測定波長下，將吸收池磨砂面用鉛筆編號，于干凈的吸收池中裝入測定用溶劑，以其中一個為參比，測定其它吸收池的吸光度，若測定的吸光度為零或兩個吸收池的吸光度相等，即為配對吸光池。若不能配對，可選出吸光度zui小的吸收池為參比，測定其它吸收池的吸光度，求出修正值。測定樣品時，將待測溶液裝入標準過的吸收池中，將測得的吸光度值減去該吸收池的修正值即為測定的真實值。